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合肥微滴式数字PCR服务 来电咨询 上海朝瑞生物科技供应

信息介绍 / Information introduction

PCR扩增过程在芯片上实现。**终对阳性微滴计数从而得到精细的核酸***数量。作为***三个荧光通道检测的数字PCR平台,Naica™ crystal数字PCR系统可在2小时内实现多达36个目标基因的检测,合肥微滴式数字PCR服务,合肥微滴式数字PCR服务。Naica™ Crystal系统由Geode微滴生成;扩增仪和Prism3微滴阅读分析系统组成,*需***耗材——Sapphire芯片,合肥微滴式数字PCR服务,即可完成从加样、微滴生成和扩增,直到采集数据获得结果。 r> Naica™ crystal数字PCR可用于:基因表达差异检测;拷贝数变异(CNV);低丰度及稀有序列的精确定量;甲基化含量鉴定;*****的伴随诊断;无创产前筛查;病原微生物的检测(***、细菌等);二代测序辅助建库;*****的实时监控 (ctDNA检测)等。

原**白表达是将植物、动物、微生物等的目的基因插入合适载体后导入大肠杆菌(E. coli)表达出大量目的蛋白。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下优点:易于生长和控制;易于培养,实验耗费少;可选择多种大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒。可从质粒构建、基因表达、蛋白纯化等一系列服务。 原核表达载体系统有:pET系列;pGEX系列。

1. 目的基因获取:客户提供含有目的基因的质粒或PCR扩增或密码子优化全基因合成。 2. 载体构建:将目的基因克隆到合适的表达载体并测序验证。 3. 蛋白表达预实验:将表达质粒转化到***的E. coli表达菌株中。挑选3个阳性克隆于LB培养基中扩增并选择合适的条件,SDS-PAGE检测蛋白表达情况,筛选出合适菌株以及比较好表达条件。 4. 蛋白表达纯化: 纯化蛋白(可溶表达—亲和纯化 包涵体表达—变性复性),SDS-PAGE、Western blotting检测验证目标蛋白正确性。实验周期:6-8周。

ddPCR技术是一种全新的核酸检测方法,通过将反应体系均分到大量反应单元中,**进行PCR扩增,检测每个反应单元的荧光信号(荧光信号产生过程参考qPCR), 根据泊松分布和阳性比例计算核酸数量。数字PCR是一种新型的精确定量PCR,拥有灵敏度高,定量准确,检测的线性范围宽,特异性好,成本低等优点,是一种很有发展的分子定量检测方法。

数字PCR技术服务的优势:

1、真正的精确定量,无需外参标准品及标准曲线,数据重复性更好。

2、更高的准确性,不再依赖PCR效率,抑剂耐受度高,模板适用度广。

3、更高的分辨率,可识别1.1倍浓度差异,适合CNV等类型实验。

4、更高的灵敏度,单拷贝,0.001% ,适合单细胞基因表达、病原微生物及低频突变检测等。

5、兼容染料法和探针法,一定程度上解决探针法非特异性问题及染料法引物二聚体问题。

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